玉米赤霉烯酮降解菌的篩選、鑒定及降解酶初步提取

【摘要】：該實驗采用富集培養的方法從土壤中篩選出有效降解玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）的菌株。初篩采用ZEN涂布至無機鹽培養基作為唯一碳源，復篩是以菌株的發酵液對ZEN的降解率作為評價指標，得到一株菌株A.lwoffi.Haut.1，其發酵液在37℃下與5μg/m L ZEN共培養48 h，降解率高達93.54%。經16S rDNA基因測序分析、生理生化實驗和菌落形態觀察初步對菌株進行鑒定，并對該菌株的降解活性物質進行初步定位，最終探究丹寧-聚乙二醇法和鹽沉法對無細胞上清液進行粗降解酶的提取效果。結果表明，該菌株鑒定判斷為魯氏不動桿菌（Acinetobacter lwoffii）；該菌株的無細胞上清液的降解率最高為82.31%，無細胞上清液經加熱處理、蛋白酶K處理和蛋白酶K+SDS處理后，降解率分別為20.10%、41.67%和18.68%，說明降解活性物質主要為胞外酶；當單寧濃度為15 mg/mL，聚乙二醇溶液濃度為10 mg/mL，提出的酶液降解率為64.33%，而鹽沉法加入60%硫酸銨提出的粗酶液降解率為20.30%，因此，單寧聚乙二醇法提取降解酶效果更好。該研究為菌株降解ZEN的作用機理提供了研究基礎，也為生物降解ZEN提供了新的研究材料。